- · 《汽车与驾驶维修(汽车版[05/29]
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建立甲醛作用细胞染毒模型的研究(2)
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摘要:由于CCK-8试剂对细胞无毒性,在CCK-8方法测定OD值后,显微镜下拍照。 1.4 数据分析 用SPSS17.0软件对获得的数据进行one-way ANOVA统计,并用Graphpad prism 5.0作图,
由于CCK-8试剂对细胞无毒性,在CCK-8方法测定OD值后,显微镜下拍照。
1.4 数据分析
用SPSS17.0软件对获得的数据进行one-way ANOVA统计,并用Graphpad prism 5.0作图,所有结果至少重复3次。
2 结果
2.1 SH-SH5Y细胞培养
取 SH-SH5Y 细胞 5×103、4×103、3×103、2×103铺板 96孔板,培养12 h、24 h、48 h、72 h后,CCK-8方法于酶标仪450 nm测定OD值。细胞活力=(A药-A空)/(A对-A空)×100%.
当细胞数 4×103/孔培养 24 h、细胞数3×103/孔培养 48 h、细胞数2×103/孔培养72 h后,细胞活力与对照组无明显差异。
表1 甲醛对SH-SH5Y细胞细胞活力的影响注意:采用0 mmoL/L甲醛FA, *p<0.05对照组,**p<0.01对照组C(formaldehyde)/(mmoL/L)100. 100. 100. 0.062 5 98.** 99.** 99.**0.125 0 50.** 64.** 64.**0.250 0 22.** 11.** 8.**0.500 0 4.* 0.* 0.*1.000 0 1.* 0.* 0.*2.000 0 1. 0. 0. Cell viability/(%of control)24 h 48 h 72 h 0
图1 通过CCK-8,甲醛对SH-SH5Y细胞的细胞活力的影响
2.2 细胞活力测定
取生长对数期SH-SH5Y细胞培养于96孔板中,每孔3×103,培养24 h后,FA浓度为2 mM、1 mM、0.5 mM、0.25 mM、0.125 mM、0.062 5 mM,处理细胞24 h、48 h、72 h,每个浓度3个复孔。同时,设对照孔(加等量细胞,不加FA)和空白孔(不加细胞、FA)。
用CCK-8方法于酶标仪450 nm测定OD值。细胞活力计算方式如上。随着染毒时间延长,细胞活力下降,差异具有统计学意义(*p<0.05,**p<0.01)。显微镜下观察细胞形态,甲醛(FA)>1 mM,染毒24 h后,细胞明显变形;甲醛(FA)为0.5 mM,染毒24 h后,出现个别细胞未变形的情况;甲醛(FA)<0.25 mM,染毒24 h后,细胞形态基本正常。
文章来源:《汽车与驾驶维修(汽车版)》 网址: http://www.qcyjswx.cn/qikandaodu/2021/0303/679.html